Différence entre RT-PCR et QPCR

Transcription inverse réaction en chaîne de la polymérase (RT-PCR)

RT-PCR vs QPCR

Les progrès de la biotechnologie ont abouti à la découverte de plusieurs façons de répondre aux demandes de greffes d'organes au fil des ans. Auparavant, une personne qui donnait volontairement un organe immédiatement après le décès à un patient dans le besoin ne pouvait que lancer l'opération pour une greffe. Les études et les recherches continues des biologistes ont conduit à la découverte de cellules souches.

Les cellules souches font référence à celles qui sont extraites de l'ADN d'un embryon, ce qui servira de source pour la régénération de cellules qui seraient essentiellement un clone de l'organe où l'ADN a été récupéré. Alors que les défenseurs des droits de l'homme font pression pour l'interruption de telles procédures, des opérations réussies ont en effet prouvé l'efficacité des développements de cellules souches dans les greffes d'organes.

Avant de pouvoir comprendre et comprendre pleinement les cellules souches, il est nécessaire de se familiariser avec les différentes terminologies associées à cette découverte scientifique. La culture de cellules souches traite de l'ADN et de son codage. Il est donc essentiel que les étudiants ou toute personne intéressée par le domaine fassent la différence entre RT-PCR et qPCR..

La transcription inverse (RT-PCR) est l'une des nombreuses variantes de la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). Cette technique de laboratoire est largement utilisée en biologie moléculaire pour permettre aux scientifiques de produire plusieurs copies d'une séquence d'ADN particulière selon un processus appelé «amplification». La différence entre la RT-PCR et la PCR traditionnelle réside dans le fait que son complément d'ADN, qui utilise la transcriptase inverse. Le nouvel ADN complémentaire contenant la transcription inversée sera ensuite amplifié à l'aide de la PCR traditionnelle ou de la PCR en temps réel..

La plupart des étudiants qui étudient ce processus commettent souvent l'erreur d'interchanger PCR en temps réel et transcription inverse, car les deux sont abrégés de la même manière. Pour éviter toute confusion, les biologistes qualifient la PCR en temps réel de PCR quantitative ou qPCR..

La QPCR diffère grandement de la RT-PCR, car la qPCR est chargée de mesurer l'amplification à mesure qu'elle se produit. On peut dire que la RT-PCR commence le processus d'amplification, alors que la qPCR le mesure au fur et à mesure que la procédure se déroule.

PCR quantitative en temps réel

Le QPCR a en fait révolutionné la méthode classique à une voie en ce qui concerne la quantification de l’ADN et de l’ARN, car son application permet aux biologistes de déterminer la concentration initiale de l’acide nucléique avant même que les résultats de la réaction aient été observés. griffonné.

L'application de la qPCR, désormais considérée comme la technique d'analyse la plus puissante et la plus sensible pour les études génétiques, s'est considérablement élargie. Il est actuellement impliqué dans l'analyse quantitative de l'expression génique, le génotypage, la détection d'agents pathogènes et l'analyse de SNP, ainsi que dans les mesures d'interférence d'ARN..

La QPCR est souvent associée au processus de transcription inverse pour quantifier l'ARN messager et les microARN présents dans les cellules des tissus observés et expérimentés. Cela donne ensuite une autre différence visible entre les deux: la RT-PCR peut être utilisée pour le processus d’amplification, mais elle doit être fusionnée avec la qPCR à des fins de quantification..

Le QPCR est également connu pour être plus quantitatif car les données peuvent être collectées à mesure que la phase de croissance exponentielle (log) de la PCR progresse. Les biologistes notent que la quantité de sous-produit de la PCR est directement proportionnelle à la quantité d'acide nucléique matrice qui sera mesurée par qPCR.

Par contre, la RT-PCR est loin d’avoir un caractère quantitatif car le respect de l’intensité de la bande amplifiée sur un gel suivant le standard fixé de concentration peut conduire à une inférence «semi-quantitative»..

Résumé:

1.QPCR et RT-PCR sont deux termes utilisés en biotechnologie et utilisés pour la production de copies multiples d'ADN.
2. La RT-PCR est utilisée pour amplifier la transcription inversée du code ADN; QPCR mesure l'amplification.
3.RT-PCR est pour l'amplification, alors que qPCR est pour la quantification.
4.QPCR est de nature quantitative, tandis que la RT-PCR n’est pas.