Différence entre HPLC en phase inverse et en phase normale

le différence clé HPLC en phase inverse et en phase normale est que le HPLC en phase inverse utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire alors que la HPLC en phase normale utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire.

La HPLC en phase normale est la plus ancienne technique de HPLC utilisée par Tswett dans ses séparations d'extraits de plantes; il a utilisé de la craie dans une colonne de verre. C’est le mode classique de la chromatographie qui a conduit à l’appeler technique «normale». En revanche, la HPLC en phase inversée est le contraire de la technique normale, récemment mise au point par des scientifiques..

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que la HPLC en phase inverse?
3. Qu'est-ce que la HPLC en phase normale?
4. Comparaison côte à côte - HPLC phase inverse vs phase normale sous forme tabulaire
5. Résumé

Qu'est-ce que la HPLC en phase inverse??

La HPLC en phase inverse est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. Parmi toutes les méthodes de HPLC, nous utilisons cette méthode pour environ 70% en raison de son applicabilité et de sa reproductibilité étendues. La phase stationnaire est non polaire et la phase mobile est polaire.

La plupart du temps, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible, tel que l'acétonitrile ou le méthanol comme phase mobile. Par conséquent, les analytes interagissent avec la phase stationnaire non polaire.

Qu'est-ce que la HPLC en phase normale??

La HPLC en phase normale est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophile. C'est la méthode traditionnelle de HPLC, bien que nous ne l'utilisions pas beaucoup. La phase stationnaire est polaire et la phase mobile est non polaire. Plus important encore, la phase mobile de cette technique est 100% organique. Cela signifie qu'aucune eau n'est utilisée pour cela.

Figure 01: Profil d'échantillon pour les chromatogrammes HPLC en phase normale et en phase inverse en fonction de la polarité des composants de l'analyte.

En règle générale, la phase stationnaire contient de la silice, du cyano, du diol, des phases à liaisons amino, etc. Les phases mobiles comprennent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. Cette technique repose sur la rétention de molécules de solvant ou d'analyte sur la phase stationnaire polaire..

Quelle est la différence entre HPLC en phase inverse et en phase normale?

La HPLC en phase inverse est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. La phase stationnaire de cette technique est non polaire. La phase stationnaire est non polaire alors que la phase mobile est polaire. De plus, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau et d'un solvant organique polaire miscible, tel que l'acétonitrile ou le méthanol, en tant que phase mobile en HPLC en phase inverse. Tandis que la HPLC en phase normale est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophile. La phase stationnaire de cette technique est polaire. La phase stationnaire est polaire alors que la phase mobile est non polaire. En plus de cela, les scientifiques utilisent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. comme phase mobile de la HPLC en phase normale. L'infographie ci-dessous présente la différence entre HPLC en phase inverse et en phase normale sous forme de tableau.

Résumé - HPLC phase inverse vs phase normale

Les techniques HPLC en phase inverse et en phase normale sont deux techniques de chromatographie en phase liquide. La différence entre la HPLC en phase inverse et en phase normale réside dans le fait que la HPLC en phase inverse utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire, tandis que la HPLC en phase normale utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire..

Référence:

1. Les eaux. «Modes de séparation HPLC». HPLC - La chromatographie en phase liquide à haute performance a expliqué: Les eaux. Disponible ici  
2. «Chromatographie en phase liquide en phase normale pour la séparation des isomères et des composés instables en milieu aqueux.» Normal_Phase_LC. Disponible ici