Différence entre HPLC et HPTLC

Différence clé - HPLC vs HPTLC
 

La principale différence entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon alors que HPTLC ne permet pas une séparation quantitative des composants dans un échantillon.

La chromatographie est une méthode de séparation physique utilisée pour séparer et identifier les composants d’un mélange. HPLC et HPTLC sont des techniques chromatographiques. HPLC est une chromatographie en phase liquide à haute performance. HPTLC est une chromatographie en couche mince haute performance.

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que la HPLC?
3. Qu'est-ce que HPTLC?
4. Comparaison côte à côte - HPLC vs HPTLC sous forme tabulaire
5. Résumé

Qu'est-ce que la HPLC??

HPLC est Chromatographie en phase liquide à haute performance. C'est une technique analytique utilisée pour séparer, identifier et quantifier les composants d'un mélange. Dans cette technique, l'échantillon est dissous dans un solvant approprié. Ensuite, le solvant contenant l'échantillon passe à travers une pompe à une pression donnée. La pompe est remplie d'un matériau adsorbant solide. Ensuite, certains composants se lient fortement au matériau absorbant, tandis que d'autres se lient de manière lâche. Les composants ont ainsi des débits différents à travers la pompe. Par conséquent, les composants peuvent être séparés facilement.

Figure 01: Un système HPLC

Le matériau adsorbant qui remplit la pompe est connu sous le nom de état stationnaire. Le solvant contenant l'échantillon dissous est appelé phase mobile. La pompe utilisée dans cette technique s'appelle la colonne. La colonne est remplie d'un matériau adsorbant, le plus souvent de particules de silice. La taille de ces particules peut aller de 2 à 50 µm. Le processus de séparation dépend de la composition de la phase mobile et de la température du système. Les interactions entre la phase stationnaire et le composant de l'échantillon peuvent être des interactions hydrophobes, des interactions dipôle-dipôle, une liaison ionique, etc..

La pression de fonctionnement de la HPLC est considérablement plus élevée que celle de la chromatographie en phase liquide traditionnelle. Il se situe autour de 50-350 bars. La différence entre la chromatographie en phase liquide et la CLHP est la suivante: dans la chromatographie en phase liquide, l'échantillon tombe dans la colonne par gravité, alors que dans la CLHP, l'échantillon est mis sous pression dans la colonne. La taille de la colonne et des particules absorbantes sont également très petites par rapport à la chromatographie en phase liquide traditionnelle. Cependant, la résolution donnée par la technique HPLC est supérieure.

Qu'est-ce que HPTLC??

HPTLC est Chromatographie en couche mince haute performance. C’est la forme avancée et automatisée de la tradition TLC. Cette technique permet une résolution efficace à court terme. Dans cette méthode d'analyse, l'échantillon et une référence peuvent être analysés en même temps, ce qui permet de comparer l'échantillon à la référence. Il offre une précision analytique améliorée par rapport aux autres techniques chromatographiques. Le temps pris pour l'analyse est inférieur. La technique est une technique peu coûteuse.

Figure 02: Analyse des colorants alimentaires à l'aide de HPTLC

La méthode HPTLC est un processus simple, et l'étape de préparation des échantillons est également éliminée (dans la CCM traditionnelle, l'étape de préparation des échantillons est incluse avant la séparation. Cette étape implique le nettoyage et l'enrichissement). Le solvant peut être utilisé directement sans prétraitement, bien que d'autres techniques chromatographiques exigent des prétraitements tels que dégazage, filtration, etc..

Le matériau adsorbant utilisé dans le HPTLC est de la silice avec de très petites tailles de particules. Dans la CCM traditionnelle, la taille des particules de silice est comprise entre 5 et 20 µm, tandis qu’en HPTLC, elle est comprise entre 4 et 8 µm. L'échantillon est appliqué sur la plaque HPTLC à l'aide d'un applicateur. Cela donne une application uniforme et sûre. Ensuite, les plaques sont placées dans une chambre ayant la phase mobile. La chambre doit être saturée avec la vapeur de la phase mobile. Après le processus HPTLC, les taches qui ont été déplacées peuvent être détectées. Lors de la détection des taches sur la plaque, la technique HPTLC utilise une région UV appropriée ou une chambre à iode.

Quelle est la différence entre HPLC et HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC est une chromatographie en phase liquide à haute performance.	HPTLC est une chromatographie en couche mince haute performance.
Technique
En HPLC, la phase mobile contenant le solvant est passée dans une colonne remplie de la phase stationnaire.	En HPTLC, l'échantillon est déposé sur une plaque de CCM et est placé à l'intérieur d'une chambre contenant la phase mobile; alors l'échantillon est autorisé à migrer vers le haut de la plaque avec la phase mobile.
La mesure
En HPLC, les différences entre les débits des composants dans la colonne sont utilisées pour séparer les composants dans l’échantillon..	En HPTLC, les différences entre les distances parcourues par chaque composant de l’échantillon servent à séparer les composants de l’échantillon..
Séparation quantitative
HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon.	HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon.

Résumé - HPLC vs HPTLC

HPLC et HPTLC sont deux techniques chromatographiques. La principale différence entre HPLC et HPTLC réside dans le fait que la HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon, alors que la HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon..

Référence:

1. «Chromatographie en phase liquide à haute performance». Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 avril 2018., Disponible ici.
2. «HPTLC». LinkedIn SlideShare, 30 mai 2011, Disponible ici.

Courtoisie d'image:

1. “HPTLCplatetoMS” De Kjaergaard sur Wikipedia anglais - Transféré de en.wikipedia à Commons (Domaine public) via Wikimedia Commons
2. “HPLC” Par PD Dr. Dr. rer. nat. habil. Gertrud Morlock Professeur associé (Privatdozentin) Université de HohenheimInstitut de chimie alimentaire - G. Morlock, C. Oellig, Service de bibliographie CAMAG 103 (2009) via Wikimedia Commons