Différence entre la cytométrie en flux et FACS

Différence clé entre la cytométrie en flux et la FACS

Dans le contexte de la théorie cellulaire, les cellules constituent l’unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est une méthodologie utilisée pour séparer différentes cellules en fonction des caractéristiques physiologiques et morphologiques. Ils peuvent avoir des caractéristiques intracellulaires ou extracellulaires. Les interactions de l'ADN, de l'ARN et des protéines sont considérées comme des propriétés interactives intracellulaires, tandis que la forme, la taille et différentes protéines de surface sont considérées comme des propriétés extracellulaires. Dans la science moderne, les méthodologies de tri de cellules ont conduit à aider les différentes enquêtes dans les études biologiques et aussi dans l'établissement de nouveaux principes à travers la recherche en médecine. Le tri cellulaire est effectué selon diverses méthodologies, qui incluent à la fois des équipements primitifs avec moins d’équipement et des méthodologies technologiques avancées utilisant des machines sophistiquées. Cytométrie en flux, tri cellulaire activé par fluorescence (FACS), la sélection de cellules magnétiques et le tri de cellules uniques sont les principales méthodologies utilisées. La cytométrie en flux et le FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. FACS est un type spécialisé de cytométrie en flux. La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules, surface et volume de surface cellulaire, ce qui permet l'investigation de cellules individuelles.. FACS est un processus par lequel un échantillon de mélange de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus.. C'est le différence clé entre cytométrie en flux et FACS.

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que la cytométrie en flux?
3. Qu'est-ce que FACS
4. Similitudes entre la cytométrie en flux et le FACS
5. Comparaison côte à côte - Cytométrie en flux vs FACS sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que la cytométrie en flux??

La cytométrie en flux est une méthode utilisée pour examiner et déterminer l'expression de molécules intracellulaires et de la surface cellulaire, ainsi que pour définir et caractériser des types de cellules distincts. Il sert également à déterminer le volume et la taille des cellules et à évaluer la pureté des sous-populations isolées. Cela permet l'évaluation multi-paramètres de cellules individuelles à peu près au même moment. La cytométrie en flux est utilisée pour mesurer l'intensité de la fluorescence produite par des anticorps marqués par fluorescence qui permettent d'identifier les protéines ou les ligands qui se lient aux cellules associées..

Figure 01: Cytométrie en flux

Généralement, la cytométrie en flux comprend principalement trois sous-systèmes. Ce sont la fluidique, l'électronique et l'optique. En cytométrie en flux, cinq composants principaux sont utilisés pour le tri cellulaire. Il s’agit d’une cellule à flux (flux de liquide utilisé pour les transporter et aligner les cellules en vue d’un processus de détection optique), d’un système de mesure (pouvant comporter différents systèmes, notamment des lampes à mercure et au xénon, des systèmes de refroidissement à eau ou à haute puissance). lasers à basse puissance refroidis par air ou lasers à diodes), un CAN; Système de conversion analogique-numérique, système d'amplification et ordinateur d'analyse. L'acquisition est le processus par lequel les données sont collectées à partir des échantillons à l'aide d'un cytomètre en flux. Ce processus est assuré par un ordinateur connecté au cytomètre en flux. Le logiciel présent dans l'ordinateur analyse les informations fournies à l'ordinateur par le cytomètre en flux. Le logiciel est également capable d’ajuster les paramètres de l’expérience contrôlant le cytomètre en flux..

Qu'est-ce que FACS?

Dans le contexte de la cytométrie en flux, Tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) est une méthode utilisée pour différencier et trier un échantillon d'un mélange de cellules biologiques. Les cellules sont séparées de deux ou plusieurs conteneurs. Le procédé de tri est basé sur les caractéristiques physiques de la cellule, notamment les caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence de la cellule. Il s'agit d'une technique scientifique importante, qui peut être utilisée pour obtenir des résultats quantitatifs et qualitatifs fiables des signaux de fluorescence émis par chaque cellule. Au cours de FACS, initialement, le mélange de cellules pré-obtenu; une suspension est dirigée vers le centre d'un étroit courant de liquide qui coule rapidement. Le flux de liquide est conçu pour séparer les cellules de la suspension en fonction du diamètre de chaque cellule. Un mécanisme de vibration est appliqué au courant de suspension, ce qui entraîne la formation de gouttelettes individuelles..

Figure 02: FACS

Le système est calibré afin de créer une seule gouttelette avec une cellule. Juste avant la formation de gouttelettes, la suspension d'écoulement se déplace le long d'un appareil de mesure de fluorescence qui détecte la caractéristique de fluorescence de chaque cellule. Au point de formation des gouttelettes, un anneau de charge électrique est placé, lequel charge est induite sur l'anneau avant la mesure de l'intensité de la fluorescence. Une fois que les gouttelettes sont formées à partir du courant de suspension, une charge est piégée dans les gouttelettes qui pénètrent ensuite dans un système de déviation électrostatique. Selon la charge, le système dévie les gouttelettes dans différents conteneurs. La méthode d'application de la charge varie en fonction des différents systèmes utilisés dans le FACS. Le matériel utilisé dans le FACS est connu sous le nom de trieur de cellules activé par fluorescence..

Quelle est la similitude entre la cytométrie en flux et FACS?

• La cytométrie en flux et le FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques.

Quelle est la différence entre la cytométrie en flux et FACS?

Cytométrie en flux vs FACS
La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules, surface et volume de surface cellulaire, ce qui permet l'investigation de cellules individuelles..	FACS est un processus par lequel un échantillon de mélange de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus..

Résumé - Flow Cytométrie vs FACS

La cellule est l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est le processus par lequel les cellules sont isolées et différenciées en différentes catégories en fonction de leurs propriétés intracellulaires et extracellulaires. La cytométrie en flux et le FACS sont deux méthodes importantes pour le tri cellulaire. Les deux procédés sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. La cytométrie en flux est une méthodologie utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface, taille et volume de la surface cellulaire, ce qui permet l'investigation de cellules individuelles. FACS est un processus par lequel un échantillon de mélange de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. C’est la différence entre la cytométrie en flux et le FACS.

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Référence:

1. Cytométrie en flux (FCM) / FACS | Tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). Consulté le 22 sept. 2017. Disponible ici
2. Ibrahim, Sherrif F. et Ger van den Engh. «Cytométrie en flux et tri cellulaire». SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1er janv. 1970… Consulté le 22 sept. 2017. Disponible ici

Courtoisie d'image:

1. 'Cytometer'By Kierano - Travail personnel, (CC BY 3.0) via Wikimedia Commons
2. 'Tri de cellules assisté par fluorescence (FACS) de SariSabban - Sabban, Sari (2011) Développement d'un système modèle in vitro pour étudier l'interaction de l'IgE d'Equus caballus avec son récepteur FcεRI de haute affinité (thèse de doctorat), l'Université de Sheffield,(CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons