Électrophorèse vs électroosmose
Les méthodes de séparation physique telles que le filtrage, la distillation, la chromatographie sur colonne ne sont pas des méthodes faciles pour la séparation de certaines molécules. L'électrophorèse et l'électro-osmose sont deux autres techniques de séparation pouvant être utilisées pour séparer des particules chargées..
Qu'est-ce que l'électrophorèse??
L'électrophorèse est une technique de séparation des molécules basée sur leurs tailles. La charge de la molécule et sa capacité à se déplacer dans un champ électrique sont fondamentales pour cette séparation. C'est la technique la plus courante et la plus courante en biologie moléculaire pour séparer des molécules, notamment de l'ADN et des protéines. Ceci est principalement utilisé car il est relativement facile et peu coûteux. L'appareil pour l'électrophorèse peut être un peu compliqué et sa préparation prend un certain temps. Mais nous pouvons facilement fabriquer un appareil d'électrophorèse à partir de tout ce que nous avons au laboratoire. Les techniques d'électrophorèse peuvent varier en fonction de nos objectifs. Nous pouvons utiliser une électrophorèse à une dimension pour la séparation de l'ADN ou des protéines. L'électrophorèse bidimensionnelle est utilisée lorsque davantage d'échantillons résolus sont requis (comme dans le cas de la prise d'empreinte digitale). Un gel est utilisé comme support pour séparer les molécules. Ce gel peut être préparé sous forme de feuilles plates ou en tubes. La base de cette procédure est de séparer les molécules en fonction de leur vitesse de déplacement à travers un gel lorsqu'un champ électrique est fourni. Les molécules chargées négativement, comme l'ADN, ont tendance à voyager vers le pôle positif dans ce champ électrique, tandis que les molécules chargées positivement ont tendance à se rendre au pôle négatif. Deux types de gels sont utilisés en électrophorèse: l'agarose et le polyacrylamide. Ces deux ont des pouvoirs de résolution différents. Le gel agit comme un tamis pour filtrer les différentes tailles de molécules. Les charges électrostatiques mises en place dans le gel agissent comme la force.
La séparation dépend de la mobilité des ions.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = force agissant sur une particule
f = coefficient de frottement
V = vitesse moyenne de migration
Z = charge de la particule en migration
e = charge élémentaire
E = force du champ électrique
Les conditions nécessaires à l'électrophorèse sont relativement simples. Lors de la fabrication du gel et de l'analyse, un tampon est utilisé. Les marqueurs et les colorants sont utilisés à des fins de visualisation.
Qu'est-ce que l'électro-osmose??
C'est le processus de déplacement d'un liquide à travers un matériau en utilisant un champ électrique appliqué. Le mouvement peut se faire à travers un matériau poreux, le long d'un capillaire, d'une membrane, etc. Ceci peut être utilisé comme technique de séparation (notamment l'électro-osmose capillaire). La vitesse du liquide est linéairement proportionnelle au champ électrique appliqué. Cela dépend également du matériau utilisé pour construire le canal et de la solution utilisée. Dans l'interface, la solution et le matériau ont obtenu des charges opposées et on parle de double couche électrique. Lorsqu'un champ électrique est appliqué à la solution, la double couche électrique se déplace sous l'effet de la force de Coulomb résultante. Ceci est connu comme le flux électro-osmotique.
Quelle est la différence entre l'électrophorèse et l'électro-osmose? • En électrophorèse, les particules solides (macromolécules telles que les acides nucléiques ou les protéines) sont déplacées à l'aide d'un champ électrique. Mais en électro-osmose, un liquide bouge. • En électrophorèse, le matériau solide de support est un gel. Mais en électro-osmose cela peut être un gel, une membrane, un capillaire, etc.. |