Différence entre le vecteur phage YAC et M13
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Différence clé - vecteur de phage YAC vs M13
Le clonage de l'ADN est un processus important qui permet la propagation d'importants fragments d'ADN d'organismes. Cela nécessite la jonction d'un ADN spécifique avec un ADN vecteur pour créer un ADN recombinant qui se transforme en organisme hôte. Un vecteur est une molécule d'ADN qui se comporte comme un véhicule permettant d'introduire du matériel génétique étranger dans une autre cellule ou un autre organisme. Il devrait être capable de se répliquer à l'intérieur de l'organisme hôte et de produire de multiples copies de l'ADN recombinant. Il existe différents types de vecteurs utilisés dans le clonage de l'ADN. Le chromosome artificiel de levure (YAC) et le vecteur du phage M13 en sont deux types. La principale différence entre le vecteur phage YAC et M13 est que Le YAC est un chromosome artificiel qui se réplique dans les cellules de levure. tandis que Le vecteur phage M13 est un ADN circulaire simple brin du bactériophage M13 qui se réplique dans E Coli cellules.
CONTENU
1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que YAC?
3. Quel est le vecteur de phage M13
4. Comparaison côte à côte - vecteur de phage YAC vs M13
5. Résumé
Qu'est-ce qu'un vecteur YAC??
YAC est un chromosome construit artificiellement, capable de transporter un large segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. Il possède des séquences de centromères, de télomères et à réplication autonome essentielles à la réplication et à la stabilité. YAC devrait également porter un ou plusieurs marqueurs sélectifs et des sites de restriction pour en faire un vecteur de clonage efficace. De grandes séquences allant de 1000 kb à 2000 kb peuvent être insérées dans YAC et transférées dans la levure.
Figure 01: Vecteur YAC
Quel est le vecteur de phage M13?
Le bactériophage M13 est un virus qui infecte et se réplique dans E Coli. Le génome du bactériophage M13 est de petite taille, environ 6,7 kb. C'est un ADN simple brin, circulaire et positif. Ce virus infecte spécifiquement E Coli bactéries à travers le pilus F. Une fois qu’il pénètre l’ADNss dans la bactérie, il synthétise son brin complémentaire et devient l’ADNds ou la forme réplicative (RF) de M13. RF peut se comporter comme un plasmide dans l'organisme hôte. L’ADNdb se réplique au sein de E Coli et produit un ADNsb portant de nouveaux phages. Ces nouveaux phages sont continuellement libérés du E Coli sans tuer la cellule hôte. Cependant, l'infection ralentit la croissance de E. Coli. L'ADNdb peut être extrait de cellules bactériennes et utilisé comme vecteurs dans le clonage d'ADN. Ils sont connus sous le nom de vecteurs phagiques M13. Ils peuvent être facilement manipulés et utilisés de la même manière que les vecteurs plasmidiques.
La capacité inhérente d'infection de ces phages M13 constitue une bonne qualification pour être utilisée comme vecteur dans le clonage de gènes. Lors du développement de M13 en vecteur, plusieurs éléments doivent être incorporés dans son génome. Ils sont, un gène pour la protéine lac répresseur (lac I), la région proximale de l’opérateur du lac Z gène, un promoteur lac et un site de clonage multiple (polylinker). Lorsque l'ADNdb du M13 est utilisé en tant que vecteurs, il peut être traité en tant que vecteur plasmidique. Cependant, l'utilisation de l'ADNss M13 présente des avantages pour le séquençage de l'ADN et la mutagenèse dirigée..
Comme le vecteur du phage M13 porte plusieurs sites de clonage dans lacZ région, les vecteurs recombinés peuvent être facilement identifiés par le criblage de colonies bleu / blanc sur des plaques d’agar contenant de l’IPTG et du X-Gal. Les plaques bleues produites sur les plaques ne contiennent pas les phages recombinés. Par conséquent, les phages avec inserts peuvent être sélectionnés pour le clonage.
Figure 02: Bactériophage M13
Quelle est la différence entre YAC et M13 Phage Vector?
YAC vs M13 Phage Vector | |
| Le YAC est un chromosome obtenu par génie génétique capable de transporter un grand segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure.. | Le vecteur phage M13 est un vecteur viral développé par le bactériophage M13 utilisé pour insérer de l’ADN étranger dans E Coli. |
| Objectif | |
| Les YAC ont été conçus pour cloner de gros fragments d’ADN génomique dans de la levure.. | Les vecteurs phagiques M13 sont utilisés pour insérer de l'ADN étranger dans E Coli. |
| Longueur d'insertion | |
| Les YAC peuvent contenir des inserts génomiques de taille mégabase (1000 kb - 2000 kb). | La taille des inserts est d'environ 1500 bps. |
| Construction | |
| L'ADN YAC est difficile à purifier intact et nécessite une concentration élevée pour générer le système de vecteur YAC. | Il se produit via une chaîne électronique photosynthétique cyclique. |
| Stabilité | |
| YAC est instable. | Les phages M13 peuvent être facilement extraits. |
| Taille | |
| Les enzymes sont des molécules plus grosses. | Les phages M13 sont stables que YAC. |
Résumé - Vecteur de Phage YAC vs M13
Le YAC est un système de vecteurs construit artificiellement utilisant une région spécifique du chromosome de levure pour insérer de grands segments de matériel génétique dans des cellules de levure. Le vecteur phage M13 est un système de vecteur dérivé du bactériophage M 13 qui utilise E. coli en tant qu'organisme hôte. C'est la principale différence entre le vecteur phage YAC et M13. Les deux sont également utiles dans la technologie de l'ADN recombinant et le clonage de gènes.
Référence:
1. «Vecteur». Genetics-notes - Vector. N.p., n.d. Web. 16 mai 2017. https://genetics-notes.wikispaces.com/Vector
2. «Chromosome artificiel de levure». Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21 avril 2017. Web. 16 mai 2017. .
Courtoisie d'image:
1. “M13B” de J3D3 - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons
