Différence entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie

Différence clé - hybridation in situ vs immunohistochimie
 

Le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses est une tendance populaire où de nouvelles techniques basées sur la protéomique et la génomique sont utilisées pour identifier les tumeurs ou les cellules infectieuses, leur prolifération et les sites de développement cellulaire et pour analyser les bases génétiques de la plupart des maladies transmissibles et non transmissibles. Cela se traduira par un traitement médicamenteux précis, la conception et le développement de thérapies personnalisées pour les maladies. L'hybridation in situ (ISH) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux techniques largement utilisées en biologie du cancer et la principale différence entre l'hybridation in situ et l'immunochimie réside dans les molécules utilisées dans la procédure d'analyse.. Dans l’ISH, les sondes d’acides nucléiques sont utilisées en analyse, tandis que dans l’IHC, des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour les diagnostics diagnostiques..

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que l'hybridation in situ?
3. Qu'est-ce que l'immunohistochimie?
4. Similarités entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie
5. Comparaison côte à côte - Hybridation in situ vs immunohistochimie sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que l'hybridation in situ (ISH)??

L'hybridation in situ est une technique d'hybridation d'acide nucléique qui est directement réalisée sur une portion ou une section de tissu, dans le tissu entier ou dans des cellules. La technique repose sur la théorie de l'appariement des bases complémentaires de Watson Crick, qui permet d'obtenir des hybrides ADN-ADN ou des hybrides ADN-ARN capables de détecter des gènes mutés ou d'identifier le gène d'intérêt requis. Des séquences d'ADN simple brin, des séquences d'ADN double brin, des séquences d'ARN simple brin ou des séquences d'oligonucléotides synthétiques sont utilisées comme sondes pendant la technique d'hybridation, et ces sondes sont marquées avec un phosphore radioactif à son extrémité 5 'pour des procédures d'identification par autoradiographie ou marquées à l'aide de colorants fluorescents. . Il existe différents types de techniques ISH disponibles en fonction du type de sonde utilisé et du type de technique de visualisation suivie..

Figure 01: Hybridation in situ fluorescente

Il existe de nombreuses applications de l'ISH, principalement dans le diagnostic moléculaire des maladies infectieuses, afin d'identifier la présence d'agents pathogènes et de confirmer l'agent pathogène via un diagnostic moléculaire. Il est également utilisé dans les domaines de la biologie du développement, du caryotypage, de l'analyse phylogénétique et de la cartographie physique des chromosomes..

Qu'est-ce que l'immunohistochimie (IHC)??

Dans la technique de l'IHC, la principale molécule analysée est l'antigène. Pendant l'IHC, des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes lors de l'infection ou du statut de prolifération des cellules malignes. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps et des marqueurs enzymatiques sont utilisés pour cette technique; une de ces applications est l’ELISA (dosage d’immunosorbant lié à une enzyme). Les marqueurs peuvent également être des anticorps marqués par fluorescence ou des anticorps radio-marqués..

Figure 02: Immunohistochimie

IHC est largement utilisé pour la détection des cellules cancéreuses. Les procédures de diagnostic ciblent les antigènes présents sur les cellules tumorales pour identifier et caractériser la tumeur. La même procédure est incorporée pour diagnostiquer les agents infectieux. Les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont également utilisés pour analyser différents produits géniques en permettant la réaction de liaison anticorps-antigène entre la protéine souhaitée et l'anticorps synthétique administré..

Quelles sont les similitudes entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie?

• ISH et IHC sont des réactions très spécifiques.
• Les deux techniques sont très précises.
• Les deux techniques peuvent être utilisées dans le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses.
• Ces techniques sont réalisées dans des environnements stériles in vitro.
• Les deux sont des techniques rapides qui donnent des résultats reproductibles.
• ISH et IHC utilisent des méthodes de détection telles que le marquage radio et les techniques de fluorescence.

Quelle est la différence entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie?

Hybridation in situ vs immunohistochimie
ISH est une technique d’hybridation d’acides nucléiques directement réalisée sur une portion ou une section de tissu ou sur le tissu entier..	L'IHC est une technique dans laquelle des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes, marqueurs protéiques spéciaux placés à la surface des cellules..
Type de biomolécules analysées
ISH analyse les acides nucléiques.	IHC analyse les antigènes protéiques.
Base de la réaction biochimique
Un appariement complémentaire des bases ADN-ADN ou ADN-ARN a lieu dans cette technique.	Les interactions antigène-anticorps sont impliquées dans l'immunohistochimie.
Méthodes de détection liées à des enzymes
Les méthodes de détection liées aux enzymes ne peuvent pas être utilisées dans ISH.	Des méthodes de détection liées à des enzymes peuvent être utilisées dans l'IHC.

Résumé - Hybridation in situ vs immunohistochimie

Les diagnostics moléculaires sont des méthodes rapides et de confirmation qui peuvent être utilisées pour identifier une maladie non transmissible telle que le cancer ou une maladie transmissible telle que le VIH ou la tuberculose à partir des marqueurs moléculaires présents sur les cellules qui conduisent à la manifestation de la maladie. Les marqueurs moléculaires peuvent être présents sous forme de protéines exprimées ou au niveau génétique sur la base desquels différentes techniques innovantes sont introduites pour accroître l'efficacité et sont moins laborieuses, bien que le coût associé à ces techniques soit élevé. Ainsi, ISH dépend de la formation d'hybrides ADN-ADN ou ADN-ARN, et l'IHC dépend des réactions spécifiques entre l'anticorps et l'antigène. C'est la différence entre l'hybridation in situ.

Téléchargez la version PDF de l'hybridation in situ vs l'immunohistochimie

Vous pouvez télécharger la version PDF de cet article et l'utiliser à des fins hors ligne, conformément à la note de citation. Veuillez télécharger la version PDF ici Différence entre hybridation in situ et immunohistochimie.

Références:

1. Duraiyan, Jeyapradha et al. “Applications of immunohistochemistry.” Journal de la pharmacie et des sciences biologiques, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, août 2012, Disponible ici. Consulté le 24 août 2017.
2. «Hybridation in situ (ISH)». Centre national d'information sur la biotechnologie, Bibliothèque nationale de médecine des États-Unis., Disponible ici. Consulté le 24 août 2017.

Courtoisie d'image:

1. “FISH (Hybridation In Situ Fluorescent)” Par MrMatze - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons
2. “Immunohistochemicalstaining2” Par Imoen sur Wikipedia anglais (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons