Différence entre Phusion et Taq Polymerase

Différence clé - Phusion vs Taq Polymérase
 

Les ADN polymérases sont des enzymes largement utilisées dans les techniques de biologie moléculaire et sont également présentes naturellement dans tous les organismes qui subissent une réplication de l'ADN. Ce sont les enzymes clés de la polymérisation impliquées lors de la réplication. L'ADN polymérase est capable d'ajouter des nucléotides à l'extrémité 3 'libre du brin d'ADN, provoquant ainsi l'extension d'un nouveau brin. À l'heure actuelle, en raison des progrès de la biologie moléculaire dans le diagnostic des maladies et des applications industrielles, il est important de fabriquer des polymérases ayant diverses propriétés bénéfiques. Cela augmente la précision de la méthode et en fait une technique plus rapide. La Phusion et la Taq polymérase sont deux enzymes polymérases thermostables produites dans le commerce qui sont utilisées dans des applications moléculaires spéciales. Phusion est une ADN polymérase isolée de Pyrococcus furiosus et est principalement utilisé dans des expériences de clonage pour augmenter la fidélité. La Taq ADN polymérase est l'ADN polymérase standard utilisée dans la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) et elle est isolée de la bactérie thermostable; Thermus aquaticus. le différence clé entre les deux enzymes est le microorganisme source. Phusion est isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus alors que la Taq polymérase est isolée du thermophile, Thermus aquaticus.

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que Phusion?
3. Qu'est-ce que la polymérase Taq?
4. Similitudes entre Phusion et Taq Polymerase
5. Comparaison côte à côte - Phusion vs Taq Polymerase sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que Phusion??

Phusion ADN polymérase est une nouvelle polymérase fabriquée en isolant l'enzyme de Pyrococcus furiosus, qui est un archée extrémophile. Ces microbes résident dans des conditions de température extrêmement élevée, faisant ainsi de la polymérase une polymérase hautement thermostable. La polymérisation polymérase est utilisée pour obtenir une fidélité extrême par rapport à la polymérase thermostable conventionnelle; Taq polymérase. La polymérase de Phusion est capable d’amplifier de longues matrices jusqu’à 7,5 kb d’ADN génomique. La capacité de polymérisation optimale de la polymérase de Phusion est de 72⁰ C. Phusion est également utilisé dans les produits de clonage pour le séquençage, l'analyse de l'expression et l'analyse de la mutation..

L'ADN polymérase de Phusion a l'activité exonucléase 3 '- 5'. Cela permet la relecture du brin nouvellement synthétisé après la synthèse. Par conséquent, les mésappariements de nucléotides sont faciles à réparer. Ainsi, son taux d'erreur est moindre. Les avantages globaux de la polymérase de Phusion sont:

• Extrême Fidélité
• Haute vitesse et temps d'extension réduit
• Réactions robustes et nécessite une optimisation minimale
• Haut rendement

Figure 01: Phusion

Le principal inconvénient de la Phusion polymérase est qu’elle est inhibée en présence de désoxyuridine triphosphate (dUTP). L'accumulation de dUTP dans le mélange réactionnel peut inhiber l'action de la polymérase de Phusion. Ceci est évité en traitant le mélange réactionnel avec de la dUTPase avant d'ajouter l'enzyme. À l'heure actuelle, une variante de la polymérase de Phusion résistante à la dUTP appelée Pfu Turbo est utilisée à la place de la polymérase de Phusion pour remédier à ce problème.

Qu'est-ce que la polymérase Taq??

Taq ADN polymérase l'invention a révolutionné le domaine de la biologie moléculaire. Cela a résolu un problème majeur d'amplification de l'ADN. La Taq ADN polymérase est une enzyme polymérase thermostable extraite et isolée de la bactérie thermophile., Thermus aquaticus. La découverte de ces enzymes a conduit au développement de la PCR. Cette enzyme a permis l'utilisation de la réaction en chaîne de la polymérase dans l'amplification de l'ADN au lieu des techniques de clonage laborieuses classiques. La PCR est maintenant utilisée dans les domaines du diagnostic moléculaire, de l'agriculture et de l'industrie, et de nombreuses variantes ont été ajoutées à la technique..

Figure 02: Polymérase de Taq

La Taq ADN polymérase fonctionne dans la plage de température optimale comprise entre⁰C - 80⁰L'ADN polymérase Taq nécessite un cofacteur; magnésium pour sa fonction. La Taq polymérase n’a pas la capacité de relecture 3 '- 5'. Par conséquent, le taux d’erreur de la Taq ADN polymérase est élevé par rapport à des types plus récents d’ADN polymérases tels que la Phusion polymérase, etc. même dans le monde de la science en raison de la commodité et de la flexibilité de l'enzyme.

Quelles sont les similitudes entre Phusion et Taq polymérase?

• Les enzymes polymérase Phusion et Taq sont des enzymes de polymérisation capables d’ajouter des nucléotides à l’extrémité libre 3 'du brin d’ADN..
• Les polymérases Phusion et Taq nécessitent une séquence d’amorce pour initier la polymérisation..
• Les polymérases Phusion et Taq sont stables à la chaleur.
• Les polymérases Phusion et Taq sont toutes deux utilisées dans les mécanismes de PCR pour amplifier.
• Lors de l'ajout de la polymérase au mélange réactionnel, les polymérases de Phusion et de Taq sont ajoutées en dernier pour assurer l'efficacité de l'enzyme..
• Les polymérases Phusion et Taq sont toutes deux synthétisées dans le commerce à des fins expérimentales de biologie moléculaire.
• Les polymérases Phusion et Taq nécessitent un cofacteur pour compléter leur fonction.

Quelle est la différence entre Phusion et Taq Polymerase?

Phusion vs Taq Polymerase
Phusion est une ADN polymérase isolée de Pyrococcus furiosus et est principalement utilisé dans des expériences de clonage pour augmenter la fidélité.	La Taq ADN polymérase est l’ADN polymérase standard utilisée dans la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) et elle est isolée de la bactérie thermostable., Thermus aquaticus.
Organisme source
Phusion est extraite d'archaea extremophilic - Pyrococcus furiosus.	Ces œuvres littéraires s'étendent de la période de colonisation à la période de décolonisation.
Capacité de relecture
La capacité de relecture entre 3 et 5 pieds est présente dans Phusion.	La capacité de lecture d'épreuve de 3 '- 5' est absente dans la Taq polymérase.
fidélité
La haute fidélité est là avec Phusion.	La Taq polymérase montre une faible fidélité.
Amplification
Phusion est capable d'amplifier de longs fragments d'ADN.	La Taq polymérase est capable d’amplifier des fragments d’ADN beaucoup plus courts.
Empoisonnement dUTP
L'action de la phusion est inhibée par l'accumulation étrange.	La taq polymérase n'est pas inhibée par la dUPT.

Résumé - Phusion vs Taq polymérase

Phusion et l'ADN polymérase Taq sont deux polymérases thermostables utilisées dans les techniques de PCR. Phusion est une polymérase isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus alors que Taq est isolé des bactéries thermostables Thermus aquaticus. La découverte de la Taq ADN polymérase conduit à l'invention de la PCR. Phusion présente de nombreux avantages par rapport à Taq, ce qui a permis à Phusion de constituer une meilleure option pour la production d’ADN haute fidélité. Cependant, la Taq polymérase est toujours utilisée comme enzyme polymérase standard en PCR. C’est la différence entre Phusion et Taq polymérase.

Référence:

1. Biolabs, Nouvelle-Angleterre. «Taq DNA Polymerases». Biolabs de la Nouvelle-Angleterre: des réactifs pour l'industrie des sciences de la vie. Disponible ici  
2. «Phusion DNA Polymerase». Biolabs de la Nouvelle-Angleterre. Disponible ici 

Courtoisie d'image:

1.'GAM illustré par Nivin Nasri'By NivinN - Travail personnel, (CC BY-SA 4.0) via Wikimedia Commons  
2.'Taq'By Adenosine - Travail personnel, (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons