Différence entre la centrifugation préparative et analytique

Différence principale - Centrifugation préparative vs Centrifugation analytique

La centrifugation est une méthode de séparation dans laquelle l'application de la force centrifuge permet de sédimenter ou de fractionner un mélange hétérogène. La microcentrifugation, la centrifugation à haute vitesse et l'ultracentrifugation sont les trois types de centrifugation basés sur le volume et la vitesse utilisés dans le processus. L'ultracentrifugation utilise, entre autres méthodes de centrifugation, la vitesse angulaire maximale. La vitesse de rotation de l’ultracentrifugation atteint 1 000 000 g. Ainsi, l’ultracentrifugation est utilisée pour isoler de petites particules telles que des ribosomes, des protéines et des virus. La centrifugation préparatoire et la centrifugation analytique sont les deux types de méthodes d’ultracentrifugation. le différence principale entre centrifugation préparatoire et analytique est que La centrifugation préparative est utilisée pour pelleter de petits matériaux tels que des membranes, des organites, des virus, de l'ADN et de l'ARN, tandis qu'une centrifugation analytique est utilisée pour déterminer la masse et la forme de macromolécules telles que des complexes protéiques et le taux de sédimentation de molécules..

Zones clés couvertes

1. Qu'est-ce que la centrifugation préparative?
     - Définition, faits, utilisations
2. Qu'est-ce que la centrifugation analytique?
     - Définition, faits, utilisations
3. Quelles sont les similitudes entre la centrifugation préparative et analytique
     - Aperçu des caractéristiques communes
4. Quelle est la différence entre la centrifugation préparative et la centrifugation analytique
     - Comparaison des différences clés

Termes clés: Centrifugation analytique, Procédés analytiques, Centrifugation à gradient de densité, Centrifugeuse à grande vitesse, Centrifugation préparative, Petites particules

Qu'est-ce que la centrifugation préparative?

La centrifugation préparative fait référence à une centrifugeuse à haute vitesse utilisée dans la séparation de petites particules submicroscopiques. Il sépare les petites particules telles que les virus, les particules virales, les complexes protéiques, les protéines, les lipoprotéines, l'ARN et l'ADN plasmidique. Une centrifugeuse préparative Beckman-Coulter avec son rotor à l'intérieur est montrée dans Figure 1.

Figure 1: Centrifugeuse de préparation Beckman-Coulter

La centrifugation préparative peut également être utilisée comme méthode de centrifugation à gradient de densité. Le gradient de saccharose peut être utilisé pour séparer des organites cellulaires. Le gradient de césium peut être utilisé pour séparer les acides nucléiques.

Qu'est-ce que la centrifugation analytique?

La centrifugation analytique fait référence à une centrifugeuse à haute vitesse utilisée dans les processus analytiques. Il est utilisé pour obtenir des informations sur les types de molécules dans un échantillon particulier en connaissant la forme générale, les changements de conformation et la stœchiométrie des sous-unités. Il peut également être utilisé pour déterminer la vitesse de sédimentation des particules. Un ultracentrifuge est montré dans Figure 2.

Figure 2: Ultracentrifugeuse Beckman Coulter Optima LE-80K

Un système de détection optique est fourni avec la centrifugeuse analytique pour surveiller la rotation de l'échantillon en temps réel. Les expériences de vitesse de sédimentation et les expériences d'équilibre de sédimentation sont les deux principaux types d'expériences réalisées avec la centrifugation analytique..

Similarités entre la centrifugation préparative et analytique

• La centrifugation préparatoire et la centrifugation analytique sont des types de méthodes d’ultracentrifugation fonctionnant à des vitesses élevées telles que 1 000 000 g..
• La centrifugation préparatoire et analytique est utilisée pour séparer les petites particules.

Différence entre la centrifugation préparative et analytique

Définition

Centrifugation préparative: La centrifugation préparative est une centrifugeuse à haute vitesse utilisée dans la séparation de petites particules submicroscopiques..

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique est une centrifugeuse à grande vitesse utilisée dans les processus analytiques..

Procédures analytiques

Centrifugation préparative: La centrifugation préparative ne peut pas être utilisée dans des procédures analytiques.

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique est utilisée dans les procédures analytiques.

Type d'échantillons

Centrifugation préparative: La centrifugation préparative est utilisée dans la granulation de petites matières telles que membranes, organites, virus, ADN plasmidique et ARN.

Centrifugation analytique: La centrifugation analytique est utilisée pour déterminer la masse et la forme des macromolécules telles que les complexes protéiques et le taux de sédimentation des molécules..

Volume d'échantillon

Centrifugation préparative: Une grande taille d'échantillon peut être traitée en centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Seuls de petits volumes d'échantillon (moins de 1 mL) peuvent être traités par centrifugation analytique.

Pureté de l'échantillon

Centrifugation préparative: Des échantillons moins purs peuvent être utilisés dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Des échantillons relativement purs sont utilisés dans la centrifugation analytique.

Coefficient de sédimentation et poids moléculaire

Centrifugation préparative: La centrifugation préparative peut être utilisée pour déterminer le coefficient de sédimentation et le poids moléculaire.

Centrifugation analytique: Un coefficient de sédimentation et un poids moléculaire précis sont utilisés dans la centrifugation analytique.

Lecture optique

Centrifugation préparative: Les fractions peuvent être collectées après la centrifugation dans une centrifugation préparative et il n’ya pas de lecture optique pendant la centrifugation..

Centrifugation analytique: La progression de la centrifugation analytique peut être observée visuellement pendant la centrifugation analytique.

Arrangements de refroidissement

Centrifugation préparative: Aucun système de refroidissement n'est utilisé dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Comme la vitesse élevée génère plus de chaleur, un système de refroidissement doit être utilisé pour la centrifugation analytique.

Type de machines

Centrifugation préparative: L5-65 et L5-75 sont utilisés dans la centrifugation préparative.

Centrifugation analytique: Beckman modèle E est utilisé dans la centrifugation analytique.

Conclusion

La centrifugation préparatoire et la centrifugation analytique sont les deux types de méthodes d’ultracentrifugation qui utilisent la centrifugation à grande vitesse. La centrifugation préparative est utilisée pour séparer les petites particules telles que les ribosomes, l'ADN plasmidique et l'ARN. Cependant, la centrifugation analytique est principalement utilisée pour obtenir des mesures analytiques de l'échantillon. La principale différence entre la centrifugation préparatoire et analytique est le but de chaque type de centrifugation pendant le traitement des échantillons..

Référence:

1. Aswathi K S, étudiante à l'université centrale de Kerala. "Ultracentrifugation." LinkedIn SlideShare, 17 nov. 2015, disponible ici.

Courtoisie d'image:

1. “Centrifugeuse de préparation Beckman-Coulter Avanti J25-03" De son vrai nom: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Travail personnel (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Ultracentrifuge” de Mlw3559 sur Wikibooks Anglais (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia