Différence entre chromatographie d'affinité et d'échange d'ions

le différence clé entre affinité et chromatographie échangeuse d’ions est que on peut utiliser la chromatographie par affinité pour séparer des composants chargés ou non chargés dans un mélange, tandis que la chromatographie par échange d'ions peut être utilisée pour séparer des composants chargés dans un mélange.

La chromatographie est une technique que nous pouvons utiliser pour séparer les composants souhaités dans un mélange. Il en existe différents types tels que la chromatographie en phase liquide, la chromatographie en phase gazeuse, etc. La chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d’ions sont deux sous-catégories de la chromatographie en phase liquide. De plus, dans ces techniques, il y a deux phases. À savoir, ils sont la phase stationnaire et la phase mobile. Le but de ces techniques est de séparer les composants, en fonction de la liaison des composants, dans la phase mobile à la surface de la phase stationnaire.

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Qu'est-ce que la chromatographie d'affinité?
3. Qu'est-ce que la chromatographie par échange d'ions?
4. Comparaison côte à côte - Chromatographie d'affinité / échange d'ions sous forme tabulaire
5. Résumé

Qu'est-ce que la chromatographie d'affinité??

La chromatographie d'affinité est une technique biochimique que nous utilisons pour séparer les composants d'un mélange en fonction des interactions entre ces composants..

Les interactions que nous utilisons dans ce cas incluent les suivantes:

1. Interactions antigène-anticorps
2. Interactions enzyme-substrat
3. Interactions récepteur-ligand
4. Interactions protéines-acides nucléiques

Dans cette technique, nous utilisons les propriétés moléculaires des molécules pour cette technique de séparation. Ici, nous permettons au composé souhaité d'interagir avec une phase stationnaire via une liaison hydrogène, une interaction ionique, des ponts disulfure, une interaction hydrophobe, etc. Les molécules qui n'interagissent pas avec la phase stationnaire vont éluer en premier. Ainsi, nous pouvons le séparer du mélange. Le composé souhaité restera attaché à la phase stationnaire. Par conséquent, nous pouvons le détacher en utilisant un solvant éluant et le faire éluer pour le séparer également.

Figure 01: Une colonne chromatographique

La chromatographie d'affinité est utile pour la purification et la concentration d'une substance à partir d'un mélange en utilisant une solution tampon. En outre, il est utile pour réduire les substances indésirables dans un mélange. Lors de l'examen de l'appareil que nous utilisons pour ce processus, nous devrions utiliser une colonne remplie de notre phase stationnaire. Ensuite, nous devrions charger la phase mobile qui contient les biomolécules que nous allons séparer. Ensuite, leur permettre de se lier à la phase stationnaire. Par la suite, en utilisant un tampon de lavage, nous pouvons séparer les biomolécules non cibles, mais les molécules cibles devraient avoir une haute affinité pour la phase stationnaire afin de réussir le processus de séparation..

Qu'est-ce que la chromatographie par échange d'ions??

La chromatographie ionique est une forme de chromatographie liquide dans laquelle on peut analyser des substances ioniques. Nous l’utilisons souvent pour analyser des anions et des cations inorganiques (c.-à-d. Des anions chlorure et nitrate et des cations de potassium et de sodium). Bien que ce soit moins courant, nous pouvons également analyser les ions organiques. De plus, nous pouvons utiliser cette technique pour la purification de protéines car les protéines sont des molécules chargées à certaines valeurs de pH. Ici, nous utilisons une phase stationnaire solide à laquelle les particules chargées peuvent se fixer. Par exemple, nous pouvons utiliser les copolymères de résine polystyrène-divinylbenzène comme support solide.

Figure 02: Phases de la chromatographie par échange d'ions

Pour expliquer cela davantage, la phase stationnaire a des ions fixes tels que des anions sulfate ou des cations d'amines quaternaires. Chacun de ceux-ci devrait s'associer à un contre-ion (un ion de charge opposée) si nous voulons maintenir la neutralité de ce système. Ici, si le contre-ion est un cation, nous appelons le système une résine échangeuse de cations. Mais si le contre-ion est un anion, le système est une résine échangeuse d'anions.

Un processus d'échange d'ions comporte cinq phases principales.

1. Stade initial
2. Adsorption de la cible
3. Début d'élution
4. Fin d'élution
5. Régénération

Quelle est la différence entre la chromatographie d'affinité et d'échange d'ions?

La chromatographie d'affinité est une technique biochimique que nous utilisons pour séparer les composants d'un mélange en fonction des interactions entre ces composants, tandis que la chromatographie ionique est une forme de chromatographie en phase liquide dans laquelle nous pouvons analyser des substances ioniques. Par conséquent, la principale différence entre la chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d’ions est que nous ne pouvons utiliser la chromatographie par échange d’ions que pour la séparation de substances ioniques, tandis que la chromatographie par affinité est capable de séparer les particules chargées et non chargées. Lorsque l'on considère le principe de fonctionnement, la différence entre la chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d'ions réside dans le fait que la chromatographie par affinité se déroule du fait que les molécules cibles ont une haute affinité pour la phase stationnaire. Cependant, pour la chromatographie par échange d’ions, les molécules cibles ont une charge opposée à celle de la surface de la phase stationnaire.

L’infographie ci-dessous présente la différence entre la chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d’ions sous forme de comparaison côte à côte..

Résumé - Chromatographie d'affinité vs échange d'ions

En résumé, la chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d’ions sont deux techniques de chromatographie en phase liquide. La principale différence entre la chromatographie par affinité et la chromatographie par échange d’ions réside dans le fait que nous pouvons utiliser la chromatographie par affinité pour séparer les composants chargés ou non chargés d’un mélange, alors que nous pouvons utiliser la chromatographie par échange d’ions pour séparer les composants chargés dans un mélange..

Référence:

1. «Chromatographie par affinité». Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 octobre 2018. Disponible ici 
2. Libretexts. “Chromatographie d'échange ionique.” Chimie LibreTexts, Libretexts, 29 déc. 2016. Disponible ici  

Courtoisie d'image:

1. "Nickel resin" de Pdcook - Travail personnel, (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons 
2. ”Iex” de Daliak (domaine public) via Wikimedia Commons