Différence entre la coloration de Gram et l'acide rapide

Différence clé - Coloration de Gram vs acide rapide
 

Les bactéries sont de très petits microorganismes. Ils sont transparents et leur détection est difficile dans des conditions de vie et non colorées. Ainsi, différentes méthodes de coloration sont développées pour faciliter la détection bactérienne. Il existe trois principaux types de techniques de coloration: la coloration simple, la coloration différentielle et la coloration structurelle. La coloration différentielle est une technique qui utilise plusieurs colorants pour différencier les bactéries. La coloration de Gram et la teinture acido-résistante sont plus communément appelées taches différentielles.. La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle, qui sépare les bactéries en deux groupes appelés bactéries Gram-positives et bactéries Gram-négatives. La coloration acido-résistante est une coloration différentielle utilisée pour identifier les organismes acido-résistants tels que Mycobacterium à partir d'organismes rapides non-acides. C’est la principale différence entre la coloration de Gram et la coloration Acid Fast..

CONTENU

1. Vue d'ensemble et différence clé
2. Quelle est la coloration de Gram 
3. Quel est acide rapide
4. Similitudes entre la coloration de Gram et le jeûne acide
5. Comparaison côte à côte - Coloration de Gram vs Acid Fast sous forme tabulaire
6. Résumé

Quelle est la coloration de Gram?

La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle importante utilisée pour l'identification bactérienne en microbiologie. Cette technique a été introduite par le bactériologue danois Hans Christian Gram en 1884. La coloration de Gram divise les bactéries en deux groupes principaux nommés Gram positif et Gram négatif, qui sont très importants pour la classification et l'identification des bactéries. Les microbiologistes effectuent la coloration de Gram comme première étape de la caractérisation bactérienne au cours de leurs études..

Les bactéries sont regroupées en fonction des différences dans leur paroi cellulaire. Les bactéries à Gram positif sont composées d'une couche épaisse de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire, tandis que les bactéries à Gram négatif sont composées d'une fine couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Le résultat de la coloration en grammes sera basé sur la différence d'épaisseur de la couche de peptidoglycane de la paroi cellulaire..

La coloration de Gram est effectuée en utilisant quatre réactifs différents, à savoir: tache primaire, mordant, décolorant et contre-tache. Le cristal violet et la safranine sont utilisés comme principales et contre-taches, tandis que les grammes d'iode et d'alcool à 95% sont respectivement utilisés comme mordant et décolorant. Les étapes de base de la coloration en grammes sont les suivantes;

1. Un frottis bactérien est préparé sur une lame de verre propre, fixé à la chaleur et refroidi.
2. Le frottis est inondé de cristal violet pendant 1 à 2 minutes.
3. Le frottis est rincé à l'eau courante du robinet pour éliminer les taches en excès.
4. Grammes d'iode est appliqué sur le frottis pendant 1 minute.
5. Le frottis est rincé à l'eau courante du robinet
6. Le frottis est lavé avec de l'alcool à 95% pendant 2 à 5 secondes et rincé à l'eau courante du robinet.
7. Le frottis est contre-coloré à la safranine pendant 1 minute
8. Le frottis est rincé à l’eau du robinet, séchée et observée au microscope.

À la fin de la coloration de Gram, les bactéries à Gram négatif seront observées en rose tandis que les bactéries à Gram positif seront en violet.

Figure 01: Bactéries Gram négatives et Gram positives

Le résultat de la coloration en grammes dépend de l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans la paroi cellulaire. Au cours de l'étape de décoloration, la tache primaire et le mordant sont facilement éliminés des bactéries à Gram négatif et deviennent incolores car ils possèdent une couche mince de peptidoglycane. La tache primaire est conservée chez les bactéries à Gram positif car elles ont une couche épaisse de peptidoglycane. La contre-coloration ne sera pas efficace contre les bactéries à Gram positif en raison de la rétention de la coloration primaire. Ainsi, les bactéries à Gram positif seront visibles dans la couleur de la tache primaire, c'est-à-dire la couleur pourpre. La contre-coloration va tacher les bactéries gram-négatives et elles seront visibles dans la couleur choisie, qui est la couleur safranine. Par conséquent, il est facile de classer les bactéries en deux groupes par coloration de Gram et est utile pour la différenciation et l'identification bactériennes..

Quel est acide rapide?

La résistance aux acides est une propriété physique de certaines bactéries, en particulier leur résistance à la décoloration par les acides lors des procédures de coloration. Une fois colorés, ces organismes résistent aux procédures de décoloration à l’acide dilué ou à l’éthanol, courantes dans de nombreux protocoles de coloration. Ainsi, le nom "acide fast" est donné à ces organismes. Cette propriété est démontrée en raison de la présence d'un niveau élevé de matériau cireux (acides mycoliques) dans leurs parois cellulaires. Ce test est essentiel pour l’identification de Mycobacterium tuberculosis.

Figure 2: Mycobactéries acido-résistantes

Cette coloration acide rapide a été développée par Paul Ehrlich en 1882. La technique acide rapide d'Ehrlich a été modifiée par Ziehl-Neelsen et est maintenant utilisée plus fréquemment. La procédure de coloration rapide à l'acide implique trois réactifs différents. Carbol fuschin est utilisé comme colorant principal. L'alcool acide est utilisé comme agent décolorant. Le bleu de méthylène est utilisé comme contre-coloration. La procédure de coloration est effectuée comme suit.

1. La tache primaire (carbol fuchsine) est appliquée sur l’échantillon fixé sur la lame (toutes les cellules seront colorées en rouge).
2. La lame est chauffée à la vapeur pendant 5 minutes, ce qui entraîne correctement les taches dans les cellules.
3. Ensuite, la solution décolorante est ajoutée (ceci élimine le colorant rouge de toutes les cellules sauf les bactéries acido-résistantes)..
4. Du bleu de méthylène est ajouté en tant que contre-coloration (il colore toutes les cellules bactériennes décolorées).
5. Les bactéries acides rapides restent rouges tandis que les bactéries rapides non acides se colorent en bleu.

Quelles sont les similitudes entre Gram Stain et Acid Fast?

• La coloration de Gram et l'acide rapide sont deux techniques de coloration différentielle.
• Les deux techniques classent les bactéries en deux groupes.
• Les deux techniques utilisent deux taches et une décoloration.

Quelle est la difference entre Gram Stain et Acid Fast?

Coloration de Gram vs acide rapide
La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle qui sépare les bactéries en deux groupes: bactéries à Gram positif et bactéries à Gram négatif..	La coloration acide rapide est une coloration différentielle utilisée pour identifier les organismes acido-résistants d'organismes rapides non-acides.
Tache primaire
Le cristal violet est le colorant primaire couramment utilisé dans la coloration au gramme..	La fuchsine au carbol est la principale teinture utilisée dans les acides rapides.
Agent décolorant
L'alcool à 95% est utilisé comme agent décolorant dans la coloration de Gram.	L'alcool acide est utilisé comme agent décolorant dans les acides rapides.
Contre-tache
La coloration de Gram utilise la safranine comme contre-coloration.	La teinture rapide acide utilise du bleu de méthylène comme contre-tâche.
Observation
Les bactéries à Gram négatif sont observées dans la couleur choisie et les bactéries à Gram positif dans la couleur pourpre.	Les bactéries acido-rapides sont observées en couleur rouge et les bactéries non acido-résistantes sont en couleur bleue.

Résumé - Gram Stain vs Acid Fast

La visualisation des microorganismes à l'état vivant est difficile. Par conséquent, les colorants biologiques et les procédures de coloration sont largement utilisés pour étudier leurs propriétés. La coloration différentielle est un type de technique de coloration utilisée pour différencier les bactéries. La coloration de Gram et la coloration acide rapide sont deux techniques de coloration différentielle. La coloration de Gram différencie les bactéries à Gram négatif et les bactéries à Gram positif en fonction de l'épaisseur de leurs parois cellulaires. La coloration rapide acide différencie les bactéries acides rapides des bactéries non acides rapides en fonction de la teneur en acide mycolique dans la paroi cellulaire. C'est la différence entre acide fast et gram stain.

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Références:

1. Aryal, Sagar. «Principe, procédure, interprétation et exemples de la coloration acido-résistante.» Notes de microbiologie en ligne. N.p., 08 mai 2017. Web. Disponible ici. 20 juillet 2017.
2. Colorants différentiels pour l'identification de bactéries: Gram, Acid-fast & Endospore. N.p., n.d. Web. Disponible ici. 20 juillet 2017.

Courtoisie d'image:

1. «Ganglion lymphatique - Infection mycobactérienne atypique (IAM) - Coloration de la BAA» par Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) via Flickr
2. «Gram stain 01» de Y tambe - Fichier de Y tambe (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons