Pourquoi l'acétocarmine est-elle utilisée dans les études sur les chromosomes mitotiques?

Différentes taches sont utilisées dans la coloration de différents matériaux biologiques. Les taches réagissent avec une substance spécifique dans un échantillon biologique, donnant une couleur spécifique à cette substance. L'acétocarmine est une coloration utilisée pour la démonstration des acides nucléiques dans le chromosome. L’acétocarmine est également plus appropriée en tant que colorant acide nucléique pour d’autres raisons.. Ils sont discutés dans cet article.

Zones clés couvertes

1. Qu'est-ce qu'une tache?
     -  Définition, types de taches
2. Qu'est-ce que l'Acetocarmine?
     - Définition, caractéristiques, préparation
3. Pourquoi l'acétocarmine est-elle utilisée dans les études sur les chromosomes mitotiques?
     - Préparation, utilisation de Acetocarmine

Mots-clés: acétocarmine, chromosomes, formaldéhyde, hydrolyse, études sur les chromosomes mitotiques, colorations

Quelle est la coloration

La coloration est une technique utilisée dans les études microscopiques d'échantillons biologiques pour améliorer le contraste de l'échantillon biologique au microscope. Il met en évidence les structures des tissus biologiques telles que les populations de cellules spécifiques, les organites, l'ADN, les protéines, les glucides et les lipides. La tache peut être soit des produits chimiques synthétiques, soit des produits chimiques naturels provenant de plantes ou d'animaux. Les méthodes de coloration sont décrites ci-dessous.

1. Coloration unique - En une seule coloration, une seule coloration est utilisée pour donner une seule couleur à l'ensemble de l'échantillon biologique.
2. Double coloration - En double coloration, deux colorants sont utilisés pour colorer des organites spécifiques ou une zone spécifique.
3. Coloration multiple - Dans la coloration multiple, plus de deux taches sont utilisées pour la coloration spécifique de composants tels que les organites dans l'échantillon.

Qu'est-ce que l'Acetocarmine?

Le carmin est un colorant basique préparé à partir d'un insecte appelé Cactus. Acetocarmine est produite en mélangeant du carmin avec de l'acide acétique glacial. Il s'agit d'une coloration spécifique de l'ADN utilisée pour la visualisation de chromosomes super-enroulés au cours des différentes étapes de la mitose..

Préparation de colorant acétocarmine

1. Dissoudre 10 g de carmin dans 1 L d’acide acétique glacial à 45%.
2. Ajouter des granules d'aluminium et reflux pendant 24 h.
3. Filtrer dans des bouteilles foncées et conserver à 4 ° C.
4. La coloration peut être intensifiée en ajoutant du chlorure ferrique (ajouter 5 ml d'une solution de chlorure ferrique à 10% pour 100 ml d'acétocarmine à%).

Pourquoi la tache d'acétocarmine est-elle utilisée dans les études sur les chromosomes mitotiques?

L'acétocarmine est généralement un colorant utilisé en coloration simple. Il souille le noyau et le cytoplasme. Afin de colorer les chromosomes tout en gardant le cytoplasme incolore, l'échantillon biologique doit d'abord être traité avec du formaldéhyde, puis hydrolyser avec du HCl à 60 ° C avec le temps d'hydrolyse approprié. Enfin, il peut être traité à l’acétocarmine. Acetocarmine produit de gros agrégats de colorant dans des conditions faiblement acides (pH 4-5). La démonstration de la mitose de racine d’oignon par coloration à l’acétocarmine est montrée dans Figure 1.

Figure 1: Mitose de racine d'oignon

Cependant, l'acétocarmine est légèrement toxique par rapport aux autres colorants acides nucléiques tels que l'acéto-orcéine. Il est également moins cher que d'autres types de taches.

Conclusion

Les taches sont utilisées dans des études microscopiques pour améliorer le contraste de composants biologiques spécifiques dans un échantillon. L'acétocarmine est une coloration utilisée pour colorer l'acide nucléique à l'intérieur des cellules. L’acétocarmine colorant spécifiquement les chromosomes en dehors du cytoplasme, elle peut être utilisée pour visualiser les chromosomes dans des études sur la mitose..

Référence:

1. “ACETOCARMINE STAINING.” Université d’État du Kansas, disponible ici.
2.J. A. Rattenbury (2009) Coloration spécifique d'une substance nucléolaire avec de l'acéto-carmin, technologie de coloration, disponible ici.

Courtoisie d'image:

1. “Mitose de racine d'oignon” By staticd - Propre travail (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia